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     在细胞培养液中L-谷氨酰胺是大部分细胞培养基的基本成分;而L-谷氨酰胺是一种并不稳定的氨基酸,在中性的水溶液中会自发降解。故而需要频繁地补加L-谷氨酰胺,这就在培养过程中容易产生:(1)频繁打开盖子,增加了破坏无菌状态的可能性。(2)过多的追加L-谷氨酰胺,增加了培养基中氨的毒性水平。

             CONH2CH2CH2CHNH2COOH→OCCH2CH2CHNHCO2H+NH3

      用DMEM培养液加入二肽谷氨酰胺和在DMEM培养液中加入L-谷氨酰胺这两组培液在37℃环境中,每天取出样品在HPLC上检验二肽谷氨酰胺和L-谷氨酰胺的含量水平其结果如图1。

图1. L-谷氨酰胺和二肽谷氨酰胺在37℃DMEM培液中含量的比较

       图中指出二肽谷氨酰胺基本不水解,而L-谷氨酰胺则每天会分解释放出氨,从而提高了培液中氨的毒性水平。将L-谷氨酰胺和二肽谷氨酰胺配成溶液在121℃、20分钟高压灭菌的环境中,其结果如图2。

       二肽谷氨酰胺在细胞内被氨肽酶(E.C.3.4.11.2)所水解,产生L-谷氨酰胺和L-丙氨酸;因此在大部分细胞系统中二肽谷氨酰胺就可以象L-谷氨酰胺同样有效地被利用。二肽谷氨酰胺是最优替代物,它无需适应;既可用于贴壁细胞培养,也适合于悬浮细胞的培养。其优点如下: (1)需要长期的孵育而不补充营养的系统。(2)要求最优标准化培养基进行长期的研究。(3)对氨敏感的培养系统。(4)代谢研究。(5)高压灭菌的培养基。

       二肽谷氨酰胺可以以200mM的浓溶液直接加入到培养系统中来替代相同的L-谷氨酰胺,使细胞培养的结果更可靠。